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產(chǎn)品展示
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western blot 天能Tanon ECL化學(xué)發(fā)光液

描述:western blot 天能Tanon ECL化學(xué)發(fā)光液 是一種高敏的檢測辣根過(guò)氧化物(H RP)的化學(xué)發(fā)光底物。 主要應用于蛋白免疫印跡westen blot 實(shí)驗的發(fā)光顯色。

更新時(shí)間:2024-06-18
產(chǎn)品型號:185001
廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
詳情介紹

western blot 天能Tanon ECL化學(xué)發(fā)光液簡(jiǎn)介


ECL發(fā)光液

western blot 天能Tanon ECL化學(xué)發(fā)光液是一種高敏的檢測辣根過(guò)氧化物(H RP)的化學(xué)發(fā)光底物。 

規格

180-501  Tanon ™ ECL 化學(xué)發(fā)光底物 100ml

180-5001 Tanon ™ ECL 化學(xué)發(fā)光底物 500ml 

應用范圍

用于免疫印跡實(shí)驗的發(fā)光顯色。

保存條件

2~8℃可保存24個(gè)月



天能Tanon ECL化學(xué)發(fā)光液的性能特點(diǎn):

  • 靈敏度高能檢測pg級的抗原含量,使HRP 的檢測更容易。

  • 穩定性好:能反復進(jìn)行壓片或化學(xué)發(fā)光成像檢測,獲得良好結果。

  • 信噪比高:樣品發(fā)光信號強,背景信號低。

  • 線(xiàn)性度好:隨樣品濃度變化,能表現良好的線(xiàn)性,真實(shí)反映樣品的實(shí)際狀況。




ECL發(fā)光液-天能



ECL化學(xué)發(fā)光展示圖

天能發(fā)光液性能對比

蛋白質(zhì)印跡技術(shù)(免疫印跡實(shí)驗)又稱(chēng)為Western Blot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗方法。Western Blot主要用于檢測或分析蛋白,應用領(lǐng)域集中在基因表達研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。


01  蛋白質(zhì)印跡基本流程圖
 


02 western blot步驟
樣品準備:

  • Tanon 連續梯度預制膠(4-20% 10 孔/15 孔/17 孔);  (4-12% 10 孔/15 孔/17 孔)

  • Tanon Mops/MES 電泳緩沖液(粉劑)

  • Tanon 預染蛋白 Marker

  • Tanon 4×LDS Loading Buffer

  • Tanon 快速蛋白染液

  • 預制膠規格的選擇

 

    在不使用預制膠的情況下,需要自行配置適合蛋白電泳SDS膠,采取自制膠的方法從加入緩沖液到制膠完成這一過(guò)程大概需要花費將近1個(gè)小時(shí)。并且由于配比過(guò)程中的認為誤差容易產(chǎn)生濃度不均一,穩定性差,已出現外八型、笑臉型等條帶。采用天能系列預制膠具有較高的穩定性和均一性,使蛋白電泳條帶更清晰銳利,使得條帶更加均勻。還有重要的一點(diǎn)就是可以免去制膠的時(shí)間,大大提升了實(shí)驗效率。

蛋白轉印使用天能VE-586轉移電泳槽主要優(yōu)勢在于:它可以在不埋冰的情況完成的蛋白電泳,如果配合快速轉膜液,整個(gè)電泳過(guò)程只需不到30分鐘,可同時(shí)轉印4塊膠,操作方法也比較簡(jiǎn)便。在縮短轉印時(shí)間的同時(shí),實(shí)現了蛋白樣品的高效轉印。

03  蛋白電泳
目前常用的是SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳),蛋白質(zhì)會(huì )根據分子量大小分開(kāi),分子量的蛋白會(huì )留在膠的下部,分子量大的會(huì )在膠的頂部。

 04 轉膜
轉膜主要是將蛋白質(zhì)從凝膠轉移到膜上,常用的是NC膜和PVDF(聚偏氟乙烯),由于膜與蛋白質(zhì)高度親和的能力,所以更容易與蛋白結合。為了便于觀(guān)察電泳效果和轉膜效果,可以使用蛋白預染Marker,以方便判斷蛋白分子量大小。

蛋白預染的傳統方法是膜將置于脫色搖床上,用1×麗春紅染液振蕩預染5min。然后用水沖洗掉沒(méi)染上的染液就可看到膜上的蛋白。

蛋白轉印使用天能VE-586轉移電泳槽主要優(yōu)勢在于:它可以在不埋冰的情況完成的蛋白電泳,如果配合快速轉膜液,整個(gè)電泳過(guò)程只需不到30分鐘,可同時(shí)轉印4塊膠,操作方法也比較簡(jiǎn)便。在縮短轉印時(shí)間的同時(shí),實(shí)現了蛋白樣品的高效轉印。

 05 封閉
轉印完成后,為阻止抗體的非特異性結合,需要用脫脂牛奶或者牛血清蛋白(BSA)作為緩沖液來(lái)填充封閉空白結合位點(diǎn)。

加入二抗稀釋液(一般1:1000甚至1:10000用TBST稀釋?zhuān)?,放在搖床上,室溫下孵育1h后,用TBST在室溫下脫色搖床上洗兩次,每次10min;再用TBS洗一次,10min,即可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光反應。

注意:二抗孵育之后也要注意充分洗滌,一般30min左右為宜,如果洗膜不夠充分,顯影時(shí)會(huì )造成雜色背景。

06 ECL化學(xué)發(fā)光反應:
在工作臺上鋪一張保鮮膜,將PVDF膜置于保鮮膜上。將ECL的A和B兩種試劑在EP管內等體積混合(注意吸完A試劑后吸B試劑前要更換槍頭),然后均勻滴在PVDF膜的蛋白面,反應1~2min后,將PVDF膜上多余的ECL發(fā)光液吸干,進(jìn)行固定。

 07凝膠圖象分析
將膠片進(jìn)行掃描或拍照,使用凝膠成像儀進(jìn)行成像分析。常用的凝膠成像儀有天能系列的T4600,T5200等系列。

 

     蘇州阿爾法生物實(shí)驗器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區生物納米園(Biobay)A5幢301室。公司管理團隊專(zhuān)注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年,擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團隊與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實(shí)驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、醫療機構、檢測中心、科研機構、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗室儀器主要包括振蕩培養箱,PCR儀,移液器,生物反應器,發(fā)酵罐,移液器,超低溫冰箱,醫用冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機,天平,離心機,離心濃縮儀,生物安全柜等。

   廠(chǎng)商企業(yè)授權包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂(lè )楓,搏旅、NEST、天能、天根、奧盛在內的80個(gè)余廠(chǎng)家。  在提供產(chǎn)品的同時(shí)也為您提供生物實(shí)驗室常用的耗材試劑,以及實(shí)驗室整體搬遷、第三方檢測、計量與校準,二手儀器調劑等服務(wù)。完整的實(shí)驗室一站式體驗使您的選擇更加方便、快捷、靈活。  

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